荧光定量PCR检测项目介绍(PPT 28页)
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HBV-DNA定量
乙肝基因分型
乙肝拉米夫定耐药
HCV-RNA定量
病毒性脑炎
实时荧光定量PCR方法------TaqMan法
方法:TaqMan法
TaqMan---水解型杂交探针
实时荧光定量PCR定义
在PCR反应体系中加入荧光基团,
利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,
最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法
实时荧光定量PCR原理实时原理
常规PCR技术:
对PCR扩增反应的终点产物进行定量和定性分析
无法对起始模板准确定量,无法对扩增反应实时检测
实时定量PCR技术:
利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化,
通过Ct值和标准曲线的分析对起始模板进行定量分析
实时荧光定量PCR原理定量原理
如何对起始模板定量?
通过Ct值和标准曲线对起始模板进行定量分析
标本采集和运送
血液标本:用2ml真空采集管或1.5ml高压灭菌离心管采集血液标本,
血标本采集后在2小时内送达实验室(HCV采用EDTA抗凝的血浆)。离心
(检验单与标本一道)后用一次性吸管吸取血清或血浆加入经消毒的1.5ml的离心管中。
脑脊液:由临床医生采集后放入消毒的试管中及时送检。
用于临床标本采集的容器如试管或离心管,均应使用前高压灭菌和密封
标本采集后,应尽可能快的送至实验室,如运送时间需2小时以上,必须用冰盒送至实验室。
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