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临床生化检验应用工程师基础知识培训(doc 33页)

所属分类:企业培训

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资料简介:

主要内容
一、生化基础知识
二、生化仪器基础知识
三、部分生化项目的临床意义

 

 

内容摘要
一、 生化基础知识
1.1生化诊断试剂盒为由一定的化学品或者酶类组成的多成分混合试剂(Reagent),最终以水溶液的方式与待测物发生一系列化学或者生化反应,通过生成物或反应物中某物质的吸光度变化,测量待检测物中某种特定物质的含量。
1.2生化诊断试剂用于检测样本,包括:人体血清(主要)、血浆及尿液中的各种酶类和代谢产物,用于预测,诊断以及治疗监测,协助临床医生诊治疾病提供数据参考。
1.3按功能分为:肝功、血脂、肾功、心肌、代谢、免疫&风湿、离子&其他。
1.4试剂性能评价指标:
1 试剂外观
2批间差
3准确度
4精密度
5线性(灵敏度)
6抗干扰能力(特异性)
7稳定性
1.5试剂检测原理(朗伯比尔定律):A=Kbc
 式中,A 为吸光度;K 为吸收系数,是与入射辐射的波长及吸收物质的性质有关的常数 ;b为液层厚度,单位为cm;c 为吸收物质的浓度。当浓度的单位为 mol/L时,K 的单位为L/mol•cm,称为摩尔吸收系数,通常用ε 表示。摩尔吸收系数ε 表示物质对某一波长的辐射的吸收特性。ε愈大,表示物质对某波长辐射的吸收力愈强,因而分光光度法测定的灵敏度就愈高.
1.6理论值与实测值偏差的解释:实测值偏离了朗伯比尔定律。
偏离 Lambert-Beer定律的因素:
1复合光对Beer 定律的偏离:吸收定律要求入射光为单色光,而分光光度计单色光的纯度主要决定于色散元件及光路设计,即使高精度的仪器,也得不到纯单色光,而是波长宽度的复合光,其结果导致偏离Lambert Beer 定律。
2 杂散光的影响:杂散光(stray light) 是进入检测器待测波长以外的光。主要来源于仪器色散元件表面的散射、单色器内壁尘埃等。
3狭缝宽度的影响:单色器设有进、出口狭缝,狭缝愈窄,单色光愈纯,吸光度增加,但辐射能减小,对弱吸收带的测量有一定影响。定性分析时,为提高分辨能力常采用较小的狭缝,而定量分析时,在灵敏度允许的情况下,宜采用较大狭缝。当出、入射狭缝宽度相等时,狭缝宽度引起的误差最小。
4非吸收作用引起的误差:
1.散射效应:光吸收定律只适用于均匀的吸收体系,如待测溶液是混浊的,当光通过时,将产生散射效应。其结果使光通过吸收物质的光程不固定,散射光的一部分和透射光一起进入检测器,导致偏离 Beer 定律。因此,免疫比浊法常用多点校准来做标准曲线。


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