基因工程的基本操作程序绪论(PPT 61页)
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点击下载1、目的基因概念:
主要指的是编码蛋白质的结构基因。也可以是一些具有调控作用的因子。
2、目的基因获取方法:
Ⅰ、从基因文库中获取目的基因
Ⅱ、利用PCR技术扩增目的基因
Ⅲ、化学方法直接人工合成
基因文库的构建过程
将含有某种生物不同基因的许多DNA片断,导入到受体菌的群体中,
各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库。
PCR的全称:
聚合酶链式反应
PCR的原理:
DNA复制
PCR技术扩增目的基因的前提条件:
要有一段已知的目的基因的核苷酸序列。
利用PCR技术扩增目的基因
启动子的作用:
1、什么是转化?
2、目的基因导入植物细胞常用的方法是什么?具体过程是怎样的?
3、目的基因导入动物细胞常用的方法是什么?基本操作程序是怎样的?
4、目的基因导入大肠杆菌的方法是怎样的?钙离子有什么作用?
1、导入目的基因后需要检测哪些方面?各采取什么方法?
2、什么是DNA分子探针?检测时的DNA探针通过什么原理来检测目的基因和相应的mRNA?
3、利用抗体-抗原杂交检测的原理是什么?
归纳:基因工程的基本操作程序
获取目的基因
从基因文库
利用PCR
化学方法人工合成
构建基因表达载体
目的基因、启动子、终止子、标记基因
将目的基因导入受体细胞
农杆菌转化法、显微注射法、Ca2+处理
目的基因的检测与鉴定
检测:是否插入、转录、翻译
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